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            行業新聞
            PCR實驗室的污染源是什么?
            日期:【2023-04-10】 瀏覽次數:0

            PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其確度高達納米級別。在實際實驗過程中有哪些問題需要注意的。

            一、PCR實驗室的污染來源有哪些?

            1.樣本間交叉感染:

            收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴導致外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。

            2.實驗試劑污染:

            主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因為PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也充滿污染風險。

            3.擴增產物污染:

            大量拷貝的產物泄漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋,這是PCR反應中最主要、最常見的污染問題。因為PCR產物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數個拷貝的極限,所以極微量的PCR產物污染,就可形成假陽性。

            4.克隆質粒污染:

            作為陽性質控品的克隆質粒外溢。 

            二、PCR實驗室污染應急處理方法

            1、若核酸樣本溢出:

            立即用布或紙巾覆蓋,由外圍向中心傾倒10%的次氯酸消毒劑,約30分鐘后,清除污染物品,再用次氯酸消毒劑擦拭,并用75%酒精噴灑,移動紫外車定點照射1小時。

            2.其他不明情況污染:

            1、暫停所有實驗操作;

            2、清理實驗室內所有物品,尋找污染來源;

            3、加大實驗室的通風;

            4、對實驗室內所有表面(臺面、地面及墻面) 進行消毒;

            5、75%酒精空中噴霧;

            6、開啟紫外消毒裝置,延長紫外照射時間(4小時以上);

            7、以上措施每日進行,直至污染消除;用新試劑及確認無污染的器材進行原污染項目的試劑空白檢測,連續3次均陰性后方可進行常規檢測。

            負壓實驗室,是檢測病毒樣本的最基本條件。所謂負壓,就是在實驗室內氣壓比實驗室外環境的正常氣壓要低,在實驗室內外產生一定的壓力差,從而控制氣體流動的方向,保證氣流從實驗室外流向實驗室內,負壓能確保室內空氣不會泄漏出去造成污染,可以有效的保護環境。


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